超微量分光光度計已成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器
超微量分光光度計是一類很重要的分析儀器 ,無論在物理學、化學、生物學、醫(yī)學、材料學、環(huán)境科學等科學研究領域 ,還是在化工、醫(yī)藥、環(huán)境檢測、冶金等現(xiàn)代生產(chǎn)與管理部門 ,紫外可見分光光度計督有廣泛而重要的應用。分光光度計就是利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器,常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
超微量分光光度計已成為現(xiàn)代分子生物實驗室常規(guī)儀器。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。
核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率高的功能。可以定量溶于緩沖液的寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA。核酸的高吸收峰的吸收波長260 nm。每種核酸的分子構成不一,因此其換算系數(shù)不同。定量不同類型的核酸,事先要選擇對應的系數(shù)。如:1OD 的吸光值分別相當于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。超微量分光光度計測試后的吸光值經(jīng)過上述系數(shù)的換算,從而得出相應的樣品濃度。測試前,選擇正確的程序,輸入原液和稀釋液的體積,爾后測試空白液和樣品液。然而,實驗并非一帆風順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實驗者頭痛的問題。靈敏度越高的儀器,表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。
超微量分光光度計主要結構
各種型號的超微量分光光度計基本結構都相同,由如下五種部分組成:
1)光源(鎢燈、鹵鎢燈,氫弧燈,氘燈、氙燈或激光光源);
2)單色器(濾光片、棱鏡、光柵、全息柵);
3)樣品吸收池;
4)檢測系統(tǒng)(光電池、光電管、光電倍增管);
5)信號指示系統(tǒng)(檢流計、微安表、數(shù)字電壓表、示波器、微處理機顯像管)。
超微量分光光度計光源-單色器-樣品吸收池-檢測系統(tǒng)-信號指示系統(tǒng)。