超微量紫外分光光度計(jì)是一種非常精密的實(shí)驗(yàn)儀器,在許多領(lǐng)域都有廣泛的應(yīng)用,例如化學(xué)、生物、環(huán)境等等。本文將介紹這個(gè)儀器的原理、結(jié)構(gòu)、工作方式、優(yōu)點(diǎn)和應(yīng)用領(lǐng)域,并對(duì)其未來的發(fā)展作出展望。是根據(jù)物質(zhì)吸收特定波長(zhǎng)下的紫外線和可見光的原理進(jìn)行測(cè)量的。這個(gè)儀器能夠測(cè)定樣品對(duì)特定波長(zhǎng)的光的吸收與否,從而測(cè)定樣品的濃度或質(zhì)量。其原理基礎(chǔ)就是比色法,即利用物質(zhì)對(duì)于特定波長(zhǎng)的紫外線或可見光吸收帶來的顏色變化,從而測(cè)量樣品濃度。
超微量紫外分光光度計(jì)的主要構(gòu)成部分包括光源、單色光器、樣品室、檢測(cè)光電池、信號(hào)處理電路和數(shù)據(jù)記錄系統(tǒng)等。
光源是整個(gè)儀器的一個(gè)重要部分,一般采用Deuterium光源和鎢燈光源,其中Deuterium光源用于波長(zhǎng)范圍為200~400nm之間的紫外線吸收,而鎢燈光源則用于400~1000nm之間。
單色光器將光源發(fā)出的光束分成單色光,從而生成單一波長(zhǎng)的光線,充分保證了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和精度。在單色光器后面是樣品室,它是紫外分光光度計(jì)中很關(guān)鍵的部分。樣品室的作用是使待測(cè)試樣品與單色光接觸,這樣可以測(cè)量其光譜吸收率。樣品室還應(yīng)該具有良好的熱穩(wěn)定性和光學(xué)特性。
檢測(cè)光電池是將光學(xué)系統(tǒng)的信號(hào)變換成電信號(hào)產(chǎn)生的傳感器,其精度和靈敏度是決定整個(gè)光度計(jì)測(cè)量精度的關(guān)鍵,更為重要的是其穩(wěn)定性和抗干擾能力。
紫外分光光度計(jì)的工作方式是使用樣品室中的樣本液來吸收特定波長(zhǎng)的光,這樣就可以量化樣品中目標(biāo)物質(zhì)的濃度了。在實(shí)驗(yàn)過程中需要樣品給光路帶來的數(shù)據(jù)中減去背景噪音,只需將載有水的樣品室與測(cè)量室中的空盒子比較,就能得到背景的高峰值。具有精度高、靈敏度高、分辨率高、響應(yīng)速度快、抗干擾性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),尤其在測(cè)定生物分子時(shí)的靈敏度廣受贊譽(yù)。
超微量紫外分光光度計(jì)在化學(xué)和生物領(lǐng)域的應(yīng)用較廣,主要應(yīng)用于DNA和RNA測(cè)序、蛋白質(zhì)定量、酶活性測(cè)定等。此外,該技術(shù)也可應(yīng)用于制藥、環(huán)境、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。例如,在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中,可以用紫外分光光度計(jì)來測(cè)定某些化學(xué)物質(zhì)的濃度,從而確定化肥和農(nóng)藥的使用量。在環(huán)境領(lǐng)域中,可用于水體、空氣中某些污染物質(zhì)的檢測(cè)和定量等。