2016（第四屆）體外診斷技術(shù)峰會(huì)于3月25日在上海順利召開(kāi)。此次會(huì)議邀請(qǐng)了國(guó)內(nèi)外眾多體外診斷方面的專家學(xué)者，以及在體外診斷領(lǐng)域取得不俗業(yè)績(jī)的企業(yè)家代表。
會(huì)議的第二天來(lái)自清華大學(xué)化學(xué)系的林金明教授做了精彩的演講。演講主要圍繞著微流控芯片上給予核酸適配體的蛋白質(zhì)檢測(cè)方法研究。
演講中林教授提到。微流控芯片技術(shù)可以繼承或基本繼承化學(xué)和生物等領(lǐng)域中所涉及的樣品制備、反應(yīng)、分離、檢測(cè)等基本操作單元，以微通道形成網(wǎng)絡(luò)，貫穿整個(gè)系統(tǒng)，具有便攜、低能耗、易于制作、易于掌握等優(yōu)點(diǎn)，易于滿足生命科學(xué)對(duì)生物樣品進(jìn)行低劑量、更、高靈敏、快速分離分析的需求。利用微流控芯片夠賤一種簡(jiǎn)單便攜的裝置用于生物標(biāo)記物的檢測(cè)，有望未來(lái)戶外即時(shí)診斷和家庭醫(yī)療提供新的方法。生物標(biāo)記物特別是蛋白質(zhì)標(biāo)志物進(jìn)行快速靈敏的檢測(cè)是臨床醫(yī)療診斷、藥物治療的一個(gè)重要依據(jù)。由于微流控芯片的微型化，所需的樣品量極少（<10μL）。所以靈敏度是微流控芯片上蛋白質(zhì)分析的一個(gè)重要難點(diǎn)。
免疫分析的滾環(huán)放大技術(shù)（immuno-RCA）是一種基于免疫分析、高靈敏的核算放大技術(shù)。RCA可以在室溫、恒溫下進(jìn)行DNA擴(kuò)增，不需要特殊的一起。通過(guò)免疫反應(yīng)，目標(biāo)蛋白與功能性核酸配體相結(jié)合獲得一段具有催化作用的G-四鏈體。然后，通過(guò)RCA獲得一條重復(fù)序列的G-四鏈體。G四鏈體能與血紅素自組裝，在ABTS和過(guò)氧化氫作用下，產(chǎn)生不同的顏色，可用肉眼直接觀察。更為重要的是，根據(jù)現(xiàn)行動(dòng)力學(xué)模型進(jìn)行的RCA反應(yīng)能夠直接進(jìn)行半定量分析不需要過(guò)多的標(biāo)準(zhǔn)物。因此，RCA是一種適合在芯片上進(jìn)行信號(hào)擴(kuò)增的新技術(shù)，能及大地提高分析的敏感性和特異性，用于微量的生物大分子和生物標(biāo)志的檢測(cè)與研究，是未來(lái)生物芯片發(fā)展和普及使用*的檢測(cè)手段。
林教授的研究以檢測(cè)凝血酶為例，將微流控芯片技術(shù)和功能性核酸適配體的免疫分析技術(shù)相結(jié)合，發(fā)展了一種快速簡(jiǎn)單、高靈敏度、易于攜帶的裝置用于生物標(biāo)志物的分析。此方法在微流控芯片上平行的排列了多個(gè)微通道，并在通道上修飾具有特異性的核酸適配體目標(biāo)蛋白質(zhì)進(jìn)行的高通量、特異性捕獲和分析，降低了基質(zhì)干擾。利用滾環(huán)擴(kuò)增和G-四鏈體DNAzyme的作用，實(shí)現(xiàn)了信號(hào)的放大，提高分析的靈敏度，降低檢測(cè)限。同時(shí)，可以通過(guò)顏色的變化，可以通孤傲肉眼進(jìn)行初步的判斷。
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